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Rothenaigner, I.
;
Brenke, J.K.
;
Schorpp, K.K.
;
Hadian, K.
Methods to detect small molecule inhibition of RING E3 ligase activity.
Curr. Protoc.
2
:e414 (2022)
Verlagsversion
DOI
PMC
Free journal
möglich sobald bei der ZB eingereicht worden ist.
Abstract
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Protein ubiquitination is an essential post-translational modification that regulates a large number of cellular processes. This reaction is facilitated by the consecutive action of three central enzymes, i.e., E1 activating enzyme, E2 conjugating enzyme, and the E3 ligase. More than 600 E3 enzymes guarantee the specificity and selectivity of these reactions and thus represent an exciting, while highly underrepresented, class of drug targets. Specific methods can be employed to monitor their activity and thus query compound libraries for inhibitory small molecules. Here, we describe two protocols-one high-throughput and one low-throughput method-to detect E3 ligase activity and test small molecule modulation. © 2022 The Authors. Current Protocols published by Wiley Periodicals LLC. Basic Protocol 1: AlphaScreen assay to measure TRAF6-Ubc13 interaction Basic Protocol 2: Gel-based in vitro ubiquitination assay (K63-linked chains).
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Publikationstyp
Artikel: Journalartikel
Dokumenttyp
Wissenschaftlicher Artikel
Typ der Hochschulschrift
Herausgeber
Korrespondenzautor
Schlagwörter
Ring E3 Ligase ; Traf6 ; Ubc13 ; Alpha Screen ; Small Molecules ; Ubiquitination
Keywords plus
ISSN (print) / ISBN
2691-1299
e-ISSN
2691-1299
ISBN
Bandtitel
Konferenztitel
Konferzenzdatum
Konferenzort
Konferenzband
Zeitschrift
Current Protocols
Quellenangaben
Band: 2,
Heft: 4,
Seiten: ,
Artikelnummer: e414
Supplement: ,
Reihe
Verlag
Wiley
Verlagsort
Hochschule
Hochschulort
Fakultät
Veröffentlichungsdatum
0000-00-00
Veröffentlichungsnummer
Anmeldedatum
0000-00-00
Anmelder/Inhaber
weitere Inhaber
Anmeldeland
Priorität
Nichtpatentliteratur
Publikationen
Begutachtungsstatus
Peer reviewed
Institut(e)
Institute of Molecular Toxicology and Pharmacology (TOXI)
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